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            神經干細胞基的使用注意事項

            更新時間:2014-10-28 點擊次數:1409

               神經干細胞基的使用注意事項

            1.在配制*培養基前,請把間充質干細胞無動物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素(P/S)放到2-8℃冰箱過夜解凍,然后加入到基礎培養基中。
             
            2.在使用*培養基前,需要把培養基放到37℃恒溫水浴中預熱,注意溫度不要超過37℃。
             
            3.請把配制好的*培養基放在4℃冰箱避光保存,并盡量在一個月內使用完。若培養基要分幾次使用,請將間充質干細胞無動物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素 (P/S)解凍按用量分裝后保存。
             
            4.可不包被培養瓶,但配合貼壁材料Attachin(貨號BW110028)使用效果更佳。
             

            免疫細胞化學染色具體方法為:

            (1) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

            (2) 0.3%H2O2/0.05M PBS室溫 30min

            (3) 0.3%Triton-100/0.05M PBS 37 ℃,15min

            (4) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

            (5) 5%羊血清/0.05M PBS 37 ℃,15min

            (6) I抗(2%羊血清/0.05M PBS配) 4℃,48h

            (7) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

            (8) II抗(2%羊血清/0.05M PBS配,1:200) 37 ℃,1.5h

            (9) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

            (10) AB復合物(0.05M PBS配,1:100) 37 ℃,1.5h

            (11) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

            (12) Tris-HCl緩沖液 37 ℃,15min

            (13) DAB顯色 20min

            (14) 蒸餾水漂洗 10min×3次

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